PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Salmonella detection is a key point in food safety testing, because of the frequent association of this pathogen with food poisoning in humans. The standard bacteriological tests currently used for Salmonella-detection are time-consuming; therefore, there is a need to develop alternative methods to accelerate the detection. In order to accelerate Salmonella diagnosis, we used the immunomagnetic separation assay associated with bacteriophage P22 for the rapid detection of the following Salmonella serovars in chicken rinses of drumsticks, artificially contaminated with 5, 10, and 100 CFU/25mL of bacteria: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Heidelberg (S. Heidelberg), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) and Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium). The efficiency of the technique, represented by the time required for detection of positive and negative samples, was compared with that of the standard diagnostic tests used for this pathogen, the bacteriological assay and the polymerase chain reaction (PCR)-based test. This study confirmed the ability of the bacteriophage-associated immunomagnetic separation assay to identify 99.6% of Salmonella-positive samples of the three serovars tested. In contrast, the bacteriological assay and PCR-based test detected 95.1% and 98.5% of the Salmonella-positive samples respectively.

• Diagnostic Salmonella enterica serovars chicken rinse phage P22 Salmonella Heidelberg Salmonella Typhimurium Salmonella Enteritidis immunomagnetic

Abstract in Portuguese:

A detecção de Salmonella é um ponto crucial para a segurança alimentar, devido a frequente associação deste patógeno com infecções alimentares em humanos. O método padrão para detecção de Salmonella é o bacteriológico, mas o tempo requerido para o processamento das amostras e o diagnóstico final é longo, por isso existe a necessidade de desenvolvimento de métodos alternativos que visem acelerar esta etapa. Para isto utilizamos a separação imunomagnética associada ao bacteriófago P22 como técnica de detecção rápida para os seguintes sorovares de Salmonella: Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Heidelberg (S. Heidelberg), Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Enteritidis (S. Enteritidis) e Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium (S. Typhimurium), os quais foram inoculados artificialmente em lavados de sobre‑coxas de frango nas seguintes concentrações: 5, 10 e 100 UFC/25mL. A eficiência da técnica, representada pelo tempo requerido para detecção de amostras positivas ou negativas, foi comparado com os testes rotineiramente utilizados para detecção de Salmonella, o exame bacteriológico e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Este estudo confirmou a capacidade do teste de separação imunomagnética associado a bacteriófago, o qual identificou 99,6% das amostras positivas para Salmonella, dos três sorovares testados. Já o bacteriológico e PCR identificaram respectivamente 95,1% e 98,5% das amostras positivas.

• Diagnósticos Salmonella enterica carcaça de frango fago P22 Salmonella Heidelberg Salmonella Typhimurium Salmonella Enteritidis bacteriológico imunomagnética frangos

Abstract in English:

ABSTRACT.- Marietto-Gonçalves G.A., Martins M.T.A., Souza K.L, Takahira R.K., Gonçalves R.C. & Andreatti Filho R.L. 2016. Physiologic parameters in female Red-billed curassows (Crax blumenbachii) in rehabilitation. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(2):131-135. Laboratório de Ornitopatologia, Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Cx. Postal 560, Distrito de Rubião Júnior, Botucatu, SP 18618-000, Brazil. E-mail: gmarietto@hotmail.com The present paper reports blood gas analysis, hematologic and micro bacteriologic information on four female Red-billed curassows, rescued from illegal wild animal trading, that were undergoing habilitation for reintroduction into the wild through Projeto Centrofauna/Botucatu-SP. There is a lack of physiological data on this species, endemic to the region of Atlantic Forest (Mata Atlântica), now under threat of extinction. This lack of information makes the clinical evaluation of these birds very difficult and has a direct and adverse effect on any of these birds received for medical treatment in hospitals, veterinary clinics and centers for research and conservation, as well as in reintroduction centers.

• Red-billed curassow Crax blumenbachii mutum

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Marietto-Gonçalves G.A., Martins M.T.A., Souza K.L, Takahira R.K., Gonçalves R.C. & Andreatti Filho R.L. 2016. Physiologic parameters in female Red-billed curassows (Crax blumenbachii) in rehabilitation. [Parâmetros fisiológicos em fêmeas de Mutum do Sudeste (Crax blumenbachii) em reabilitação.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(2):131-135. Laboratório de Ornitopatologia, Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Cx. Postal 560, Distrito de Rubião Júnior, Botucatu, SP 18618-000, Brazil. E-mail: gmarietto@hotmail.com O presente artigo reporta dados inéditos de análise hemogasométrica, hematológica e bacteriológica de quatro fêmeas de Mutum do Sudeste, resgatadas do tráfico ilegal de animais silvestres e em processo de habilitação e reintrodução para vida-livre pelo Projeto Centrofauna, Botucatu/SP. Na literatura há uma falta de dados fisiológicos sobre esta espécie, endêmica da região da Mata Atlântica e ameaçada de extinção. Esta falta de informação faz com que avaliações clínicas nesta espécie aviária sejam muito difíceis de interpretar, causando um efeito direto e negativo nestas aves para a realização de tratamento médico em hospitais, clínicas veterinárias, centros de pesquisa e/ou conservação, bem como centros de reintrodução.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Donato T.C., Baptista A.A.S., Smaniotto B.D., Garcia K.C.O.D., Okamoto A.S., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2015. [Assessment of the effects of 5-hydroxytryptophan and m-hydroxybenzyl hydrazine associated with Lactobacillus spp. in intestinal morphology and immunostaining of serotonin in broilers challenged with Salmonella Enteritidis.] Avaliação dos efeitos de 5-hidroxitriptofano e m-hidroxibenzilhidrazine associados a Lactobacillus spp. na morfometria intestinal e imunomarcação de serotonina em frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(7):677-684. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: tais.donato@yahoo.com.br Enterochromaffin cells are components of the intestinal mucosa to release serotonin lumen, promoting cell growth and secretory activity of various tissues, including intestinal villi. This study evaluated the influence of 5-hydroxytryptophan (5HTP) and m-hidroxibenzilhidrazine (NSD1015) associated with Lactobacillus spp. on body weight and development of intestinal villi in the proximal duodenum of broilers challenged with Salmonella Enteritidis. It was found that the presence of Lactobacillus spp. and Salmonella Enteritidis influenced immunostaining of serotonin in the duodenum. The study was divided into two experiments with and without challenge by S. Enteritidis. In Experiment 1, birds without challenge, body weights did not differ significantly (p>0.05), and in Experiment 2, the treatments with precursor and precursor associated with Lactobacillus spp. determined higher body weight of the birds. In both experiments the birds treated with 5HTP showed increased density and villus height in the duodenum, suggesting the presence of 5HTP as a trophic agent. The use of Lactobacillus spp. also determined greater duodenal villus height. The immunostaining of serotonin, birds treated with Lactobacillus spp. in Experiment 1, and the birds treated with Lactobacillus spp. and challenged with S. Enteritidis in Eperiment 2 showed higher values, suggesting that the presence of these bacteria promotes greater release of serotonin into the duodenum. The exact mechanism of how this process occurs needs to be further elucidated.

• Serotonin Salmonella Enteritidis Lactobacillus spp. 5-hydroxytryptophan m-hydroxybenzyl hydrazine serotonina 5-hidroxitriptofano m-hidroxibenzilhidrazine

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Donato T.C., Baptista A.A.S., Smaniotto B.D., Garcia K.C.O.D., Okamoto A.S., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2015. [Assessment of the effects of 5-hydroxytryptophan and m-hydroxybenzyl hydrazine associated with Lactobacillus spp. in intestinal morphology and immunostaining of serotonin in broilers challenged with Salmonella Enteritidis.] Avaliação dos efeitos de 5-hidroxitriptofano e m-hidroxibenzilhidrazine associados a Lactobacillus spp. na morfometria intestinal e imunomarcação de serotonina em frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(7):677-684. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: tais.donato@yahoo.com.br As células enterocromafins são um dos componentes da mucosa intestinal que liberam serotonina para o lúmen, promovendo atividades secretórias e crescimento celular de vários tecidos, incluindo vilosidades intestinais. O presente estudo avaliou as influências do 5-hidroxitriptofano (5HTP) e do m-hidroxibenzilhidrazine (NSD1015), associados a Lactobacillus spp., sobre o peso corporal e o desenvolvimento das vilosidades intestinais na porção proximal do duodeno de frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis. Verificou-se também se a presença de Lactobacillus spp. e Salmonella Enteritidis influenciaram a imunomarcação de serotonina no duodeno e, para isso, o estudo foi dividido em dois experimentos, com e sem desafio por S. Enteritidis. No Experimento 1, em aves sem desafio, os pesos corporais não diferiram significantemente (p>0,05) e, no Experimento 2, aves com desafio, os tratamentos com o precursor isolado e associado a Lactobacillus spp. determinaram maior peso corporal das aves. Nos dois experimentos, as aves tratadas com 5HTP apresentaram aumento na densidade e altura das vilosidades no duodeno, sugerindo a atuação de 5HTP como um agente trófico. A administração de Lactobacillus spp. também determinou altura maior de vilosidades duodenais. Quanto a imunomarcação de serotonina, as aves tratadas com Lactobacillus spp. no Experimento 1 e as aves tratadas com Lactobacillus spp. e desafiadas com S. Enteritidis no Experimento 2, apresentaram valores superiores aos demais tratamentos, sugerindo que a presença destas bactérias promove maior liberação de serotonina para o duodeno, porém o mecanismo exato de como este processo ocorre necessita ser mais elucidado.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Baptista A.A.S., Donato T.C., Souza, E.E., Gonçalves G.A.M., Garcia, K.C.O.D., Rodrigues J.C.Z., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2013. Induction of immune response in broiler chickens immunized with recombinant FliC and challenged by Salmonella Typhimurium. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1215-1221. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: angelita_sampaio@yahoo.com.br The study examined (1) the immune response in broiler chickens after oral immunization with recombinant flagellin (rFliC) from Salmonella Typhimurium conjugated with sodium alginate microparticles, and the immune response enhancement in association with recombinant cholera toxin B subunit protein (rCTB) and pool of Lactobacillus spp. (PL). The immune responses were evaluated by dosage of IgY serum and IgA from intestinal fluid and immunostaining of CD8+ T lymphocytes in the cecum. The immunized animals were challenged with Salmonella Typhimurium (ST) 21 days after treatment. In all immunized groups, a significant increase (p<0.05) was observed in IgA levels (mg/mL), especially three weeks after immunization. The serum IgY levels (mg/mL) were little affected by the treatments and differed significantly among groups only in the second post-immunization week (p<0.05). After the challenge, the number of CD8+ T cells differed significantly between the treatments and negative control. Retrieval of Salmonella Typhimurium was not detected at 48 hours after the challenge in T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) and T4 (rFliC+rCTB PL). The rFliC administered orally with or without rCTB and Lactobacillus spp. produces significant induction of humoral immune response, and the immunized chickens were more effective in eliminating Salmonella after challenge.

• Salmonella Typhimurium FliC

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Baptista A.A.S., Donato T.C., Souza, E.E., Gonçalves G.A.M., Garcia, K.C.O.D., Rodrigues J.C.Z., Sequeira J.L. & Andreatti Filho R.L. 2013. Induction of immune response in broiler chickens immunized with recombinant FliC and challenged by Salmonella Typhimurium. [Indução de resposta imune em frangos de corte imunizados com FliC recombinante e desafiados por Salmonella Typhimurium.] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(10):1215-1221. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unesp-Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18608-970, Brazil. E-mail: angelita_sampaio@yahoo.com.br Este estudo investigou a resposta imunitária de frangos de corte após a imunização oral com flagelina recombinante (rFliC) de Salmonella Typhimurium conjugada com micropartículas de alginato de sódio, e como intensificador de resposta imune foi associada a proteína subunidade B da toxina colérica (rCTB) e pool de Lactobacillus spp. (PL). As respostas imunes foram avaliadas por dosagem de IgY sérica e IgA do fluído intestinal e imunomarcação de linfócitos T CD8+ presentes no ceco. Os animais imunizados foram desafiados aos 21 dias após tratamento com Salmonella Typhimurium (ST). Foi observado em todos os grupos imunizados um aumento significativo (p<0,05) nos níveis de IgA (mg/mL) principalmente três semanas após as imunizações. Os níveis de IgY sérica (mg/mL) foram pouco influenciados pelos tratamentos, apenas na segunda semana após imunização observou-se diferenças significativas (p<0,05) entre os grupos. Observou-se que o número de linfócitos T CD8+ apresentou diferença significativa entre os tratamentos e o controle negativo após o desafio. Quanto a recuperação de Salmonella Typhimurium, observou-se que 48 horas após o desafio já não havia detecção do agente nos grupos T2 (rFliC+rCTb), T3 (rFliC+PL) e T4 (rFliC+rCTB+PL). Concluí-se que rFliC administrada, via oral, associada ou não a Lactobacillus spp e rCTB, demonstrou induzir significativamente a resposta imune humoral e que as aves imunizadas foram mais eficientes na eliminação de Salmonella após desafio.